EFEITO ANTI-NEUROINFLAMATÓRIO DO EXTRATO SECO DE Amburana cearensis PADRONIZADO (HPLC-PDA) EM CÉLULAS MICROGLIAS E NEURONAIS

Resumo

Estudos têm demonstrado a influência da neuroinflamação no desenvolvimento de doenças neurodegenerativas, como a doença de Parkinson (DP) e nesse processo, dentre os mecanismos celulares envolvidos, destaca-se o papel importante das células microgliais. Diante das limitações da farmacoterapia atual para o tratamento da DP, a pesquisa de novos fármacos é essencial, e nosso grupo têm mostrado diferentes atividades farmacológicas do extrato e/ou moléculas de Amburana cearensis como, anti-inflamatória, antioxidante e neuroprotetora sobre a neurotoxicidade induzida por 6-hidroxidopamina (6-OHDA) em células mesencefálicas de ratos. Diante do exposto, o objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do extrato seco de A. cearensis cultivada (ESAC) em células microgliais e sobre o meio condicionado (oriundo de células BV-2 estimuladas com LPS) em células neuronais (PC-12) exposta à 6-OHDA. O ESAC foi caracterizado por HPLC-DAD com os marcadores químicos: CM (70,07 ± 0,01 mg/g), AMB (30,40 ± 0,01 mg/g) e AV (2,70 ± 0,01 mg/g). Para isso, foram utilizadas células de linhagem BV-2 e PC-12, mantidas em meio RPMI-1640, 10% de FBS, 5% de CO₂ a 37° C. A citotoxicidade do ESAC foi avaliada por meio do teste do MTT. O efeito do extrato sobre as células expostas ao LPS (0,5 μg/mL) foi investigado pela determinação da concentração de mediadores pró-inflamatórios como o óxido nítrico (ESAC: 5-100 μg/mL), e expressão da proteína iNOS (100 μg/mL). Diante disso, a adição de ESAC (5-100 μg/mL) às células BV-2 em cultura não alterou a viabilidade celular (teste MTT) e reduziu significativamente o aumento da produção de óxido nítrico (NO) induzido por LPS (0,5 μg/mL) em células BV-2, atingindo redução máxima em 100 μg/mL ( 6,1 ± 1,0 μM), quando comparamos com LPS (13,0 ± 1,4 μM). O pré-tratamento com ESAC reduziu em 50% a expressão proteica da enzima iNOS quando comparado ao grupo induzido por LPS. No presente estudo, observou-se que o ESAC presente no meio condicionado, preveniu a perda da viabilidade e diminuiu a liberação de NO de células neuronais PC-12 expostas à 6-OHDA e meio condicionado. Tais resultados nos fornece base experimental de que o ESAC apresenta potencial terapêutico para o tratatmento de doenças inflamatórias, como a DP.